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基因硕士论文提纲范文一
附件 3-4
摘要 4-8
Abstract 8-11
缩略词表 12-18
第一章 文献综述 18-36
1.1 黄瓜 18
1.2 乙烯的生理作用与生物合成 18-19
1.3 植物激素乙烯与黄瓜性型 19-23
1.3.1 黄瓜性型 19-20
1.3.2 黄瓜性别决定基因 20-23
1.4 乙烯信号转导途径 23-30
1.4.1 乙烯受体 25-26
1.4.2 CTR1 26-27
1.4.3 EIN2 27-29
1.4.4 EIN3/EILs 29-30
1.4.5 乙烯信号转导途径中其他元件相关研究简述 30
1.5 黄瓜遗传转化研究进展 30-35
1.5.1 基因型 31-32
1.5.2 外植体类型及苗龄 32
1.5.3 不同激素组合 32
1.5.4 转化方法 32-33
1.5.5 目的基因 33-35
1.6 本研究的目的 35-36
第二章 黄瓜乙烯信号转导途径 CsCTR1 基因的克隆和功能研究 36-61
2.1 引言 36
2.2 材料和方法 36-44
2.2.1 试验材料 36-39
2.2.2 试验方法 39-44
2.3 结果与分析 44-58
2.3.1 黄瓜 CsCTR1 基因开放阅读框(ORF)的获得与序列分析 44-45
2.3.2 CsCTR1 与其他物种中 CTR1 蛋白的进化分析和多重比对分析 45-48
2.3.3 CsCTR1 基因启动子序列分析 48
2.3.4 CsCTR1 基因在拟南芥中突变株 ctr1-1 的过量表达分析 48-53
2.3.5 CsCTR1 基因在黄瓜不同组织中的表达 53-54
2.3.6 CsCTR1 基因在黄瓜花发育不同时期的表达情况 54-55
2.3.7 乙烯利和 AVG 处理对 CsCTR1 表达的影响 55-57
2.3.8 近等基因系间 CsCTR1 的表达情况 57-58
2.4 讨论和小结 58-61
第三章 黄瓜乙烯信号转导途径 CsEIN2 基因的克隆和功能研究 61-84
3.1 引言 61
3.2 材料和方法 61-68
3.2.1 试验材料 61-63
3.2.2 试验方法 63-68
3.3 结果与分析 68-81
3.3.1 黄瓜 CsEIN2 基因全长 cDNA 的克隆与序列分析 68-69
3.3.2 CsEIN2 与其他物种中 EIN2 蛋白的进化分析和多重比对分析 69-75
3.3.3 CsEIN2 基因启动子序列分析 75-76
3.3.4 CsEIN2 基因在黄瓜不同组织中的表达 76
3.3.5 CsEIN2 基因在黄瓜花发育不同时期的表达情况 76-77
3.3.6 乙烯利和 AVG 处理对 CsEIN2 表达的影响 77-79
3.3.7 近等基因系间 CsEIN2 的表达情况 79
3.3.8 CsEIN2 基因在拟南芥中突变株 ein2-1 的过量表达分析 79-81
3.4 讨论和小结 81-84
第四章 黄瓜乙烯信号转导途径 CsEIN3 基因的克隆和表达分析 84-97
4.1 引言 84-85
4.2 材料和方法 85-88
4.2.1 试验材料 85-86
4.2.2 试验方法 86-88
4.3 结果与分析 88-95
4.3.1 黄瓜 CsEIN3 基因全长 cDNA 的克隆与序列分析 88-89
4.3.2 CsEIN3 与其他物种中 EIN3/EIL 蛋白的进化分析和多重比对分析 89-92
4.3.3 CsEIN3 蛋白的 3-D 模型 92-93
4.3.4 CsEIN3 基因在黄瓜不同组织中的表达 93
4.3.5 CsEIN3 基因在黄瓜花发育不同时期的表达情况 93-94
4.3.6 近等基因系间 CsEIN3 的表达情况 94-95
4.4 讨论和小结 95-97
第五章 黄瓜遗传转化体系研究 97-111
5.1 引言 97
5.2 材料与方法 97-101
5.2.1 试验材料 97-98
5.2.2 方法 98-101
5.3 结果与分析 101-108
5.3.1 不同苗态对黄瓜遗传转化效率的影响 101-104
5.3.2 植物生长调节剂对黄瓜子叶节再生的影响 104
5.3.3 Kan 选择压筛选 104-106
5.3.4 预培养时间对黄瓜遗传转化效率的影响 106
5.3.5 侵染及共培养时间对黄瓜遗传转化效率的影响 106-107
5.3.6 不同筛选策略对黄瓜遗传转化效率的影响 107-108
5.4 讨论和小结 108-111
第六章 总结与展望 111-114
6.1 研究总结 111-112
6.2 创新点 112-113
6.3 后续工作展望 113-114
参考文献 114-126
附录 126-128
致谢 128-130
攻读博士学位期间发表的论文 130-131
攻读博士学位期间申请的专利 131-133
基因硕士论文提纲范文二
摘要 5-8
ABSTRACT 8-12
第一章 文献综述 18-42
1.1 花色素的成分及合成 18-21
1.2 矮牵牛的起源及育种概况 21-23
1.3 矮牵牛育种目标 23-26
1.4 矮牵牛的花色相关基因研究 26-34
1.5 矮牵牛的花色基因工程研究 34-37
1.6 矮牵牛遗传转化方法发展 37-39
1.7 小花矮牵牛与矮牵牛关系 39-41
1.8 本研究目的与意义 41-42
第二章 矮牵牛 DFR 基因分离及表达特性分析 42-63
2.1 材料与方法 42-47
2.1.1 实验材料 42
2.1.2 主要试剂 42
2.1.3 DFR 基因克隆 42-45
2.1.4 DFR 基因表达相对定量测定 45
2.1.5 DFR 酶活性测定 45-46
2.1.6 不同株系矮牵牛花色素苷含量的测定 46-47
2.2 结果与分析 47-61
2.2.1 RNA 提取 47-48
2.2.2 矮牵牛 DFR 基因分离 48
2.2.3 矮牵牛 DFR 特性分析 48-50
2.2.4 矮牵牛 DFR 基因表达组织特异性分析 50-53
2.2.5 矮牵牛 DFR 酶活性组织特异性分析 53-54
2.2.6 DFR 酶活性与 DFR mRNA 相关性 54-55
2.2.7 矮牵牛中花青素苷含量 UPLC 检测方法优化 55-61
2.2.8 不同矮牵牛株系中花青素苷含量测定 61
2.3 讨论 61-62
2.4 本章小结 62-63
第三章 四种植物 DFR 基因克隆及表达载体构建 63-84
3.1 材料与方法 63-69
3.1.1 四种植物 DFR 基因克隆 63-65
3.1.2 表达载体构建 65-69
3.2 结果与分析 69-80
3.2.1 四种植物来源 DFR 基因克隆 69-78
3.2.2 DFR 表达载体构建 78-80
3.3 讨论 80-83
3.3.1 DFR 基因 CDS 区的获取 80-81
3.3.2 RNA 提取适宜时期及方法探讨 81
3.3.3 基于 SMART 试剂盒的 RACE 操作 81-82
3.3.4 CaDFR 的特点分析 82
3.3.5 外源 DNA 对大肠杆菌转化效率的影响 82
3.3.6 质粒的量对大肠杆菌转化效率的影响 82
3.3.7 扩增外源基因中酶的选择 82-83
3.4 本章小结 83-84
第四章 矮牵牛转化及转化子鉴定 84-102
4.1 材料与方法 84-90
4.1.1 材料 84
4.1.2 试剂与引物 84
4.1.3 方法 84-90
4.2 结果与分析 90-99
4.2.1 受体材料生物学特征 90-91
4.2.2 矮牵牛种子无菌萌发 91
4.2.3 矮牵牛卡那霉素选择压的确定 91-93
4.2.4 农杆菌介导的叶盘法转化矮牵牛 93-95
4.2.5 炼苗成活率影响因素 95-97
4.2.6 转化植株的检测鉴定 97-99
4.3 讨论 99-101
4.3.1 共培养后 MS 液体培养基振荡抑菌对外植体活力的影响 99-100
4.3.2 适宜的抗生素种类筛选 100
4.3.3 适宜的头孢霉素浓度 100
4.3.4 延迟培养对转化的影响 100
4.3.5 生根培养中的筛选剂添加的必要性 100-101
4.4 本章小结 101-102
第五章 转化子表型观察及表达测定 102-130
5.1 材料与方法 102-103
5.1.1 DFR 基因表达相对定量测定 102
5.1.2 DFR 酶活性测定 102
5.1.3 转化子花色素苷含量的测定 102-103
5.2 结果与分析 103-122
5.2.1 DFR 表达相对定量检测标准曲线绘制 103-105
5.2.2 ‘9702’转入不同 DFR 基因表型及表达分析 105-116
5.2.3 ‘Lx’转入不同 DFR 基因表型及表达分析 116-119
5.2.4 ‘2512’转入不同基因表型及表达分析 119-121
5.2.5 ‘W115’转入不同 DFR 基因表型及表达分析 121-122
5.3 讨论 122-127
5.3.1 不同来源 DFR 对矮牵牛花色的影响 122-123
5.3.2 外源基因在矮牵牛的'表达不同的可能原因 123-124
5.3.3 ‘LH26’表型的可能原因 124
5.3.4 飞燕草色素的 UPLC 检测 124-125
5.3.5 UPLC 检测单一花青素苷标准品的可能性 125
5.3.6 外源基因拷贝数对花色的影响 125
5.3.7 DFR mRNA 相对浓度与外源基因拷贝数的关系 125
5.3.8 调节基因 AN2 对花色的影响 125-126
5.3.9 花药中 DFR 基因的表达 126
5.3.10 DFR 酶活性与花青素苷含量相关性分析 126-127
5.4 本章小结 127-130
第六章 转化子遗传稳定性观测 130-134
6.1 材料与方法 130
6.2 结果与分析 130-132
6.2.1 转基因矮牵牛 T1 代生物学表型 130-132
6.2.2 PCR 检测结果 132
6.3 讨论 132-133
6.3.1 T1 代种子发芽率低的可能原因 132-133
6.3.2 T1 代种子性状分离的原因 133
6.4 本章小结 133-134
第七章 本文总结 134-139
7.1 研究的主要结论 134-136
7.2 研究的创新点 136
7.3 研究中发现的问题 136-137
7.4 今后工作展望 137-139
附录 139-151
附录1:符号说明 139-140
附录2:本研究中使用的主要仪器设备 140-142
附录3:分离的 DFR 序列 142-151
参考文献 151-163
致谢 163-165
攻读博士学位期间已发表或录用的论文 165
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